结构特点
6 孔板是一种常见的细胞培养耗材,它由透明的聚苯乙烯材料制成。每个孔的直径相对较大,一般可以提供足够的空间用于类器官培养。孔板底部平坦,有利于类器官在底部均匀分布生长,并且便于在显微镜下观察类器官的形态和生长状态。
适用范围
适用于多种类器官的培养。例如,肠道类器官、肝脏类器官、胰腺类器官等都可以在 6 孔板中培养。对于起始细胞数量较多或者希望类器官生长有一定空间的情况比较合适。如果是从少量组织样本或者单细胞开始培养类器官,6 孔板的每孔空间可以满足细胞增殖和类器官形成的初期需求。
与培养基的配合使用
在 6 孔板中培养类器官时,根据不同类器官的要求加入特定的培养基。一般每孔可以加入适量的培养基,如 2 - 3 毫升左右,以保证类器官能够充分浸泡在营养物质中,同时又不会因为液体过多而导致类器官漂浮或者碰撞受损。培养基的成分可以根据类器官的类型进行定制,包括基础培养基(如 DMEM/F12)、生长因子(如 EGF、FGF 等)、营养添加剂(如 N2、B27)等。
培养环境要求
6 孔板应放置在温度稳定(通常 37℃)、湿度适宜(一般 95% 左右)、二氧化碳浓度(5%)的细胞培养箱中。这样的环境可以保证培养基的 pH 值稳定,为类器官的生长提供良好的条件。同时,6 孔板的透明材质便于观察类器官的生长,在不打开培养箱的情况下,可以通过培养箱的观察窗或者使用带有成像功能的培养箱来监测类器官的状态。
操作便利性
6 孔板的孔数相对较少,在进行实验操作时比较方便。例如,在更换培养基、添加药物或者进行其他处理时,可以比较容易地对每个孔进行操作,减少了实验操作过程中的失误概率。而且,在需要进行分组实验时,6 孔板可以方便地设置不同的实验组和对照组,每孔可以作为一个独立的实验单元,有利于实验数据的对比和分析。
培养过程中的注意事项
在接种细胞或者类器官起始材料时,要注意均匀分布。可以通过轻柔摇晃或者用移液器缓慢滴加的方式,使细胞或起始材料均匀地分布在 6 孔板的底部。另外,由于 6 孔板的每孔面积相对较大,在培养过程中要注意防止污染,在打开培养箱和操作 6 孔板时,要严格遵循无菌操作原则,如使用无菌镊子、移液器和在无菌超净台内操作等。