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NanoDrop One光度计的使用流程是什么
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科汇华晟

时间 : 2025-03-23 11:56 浏览量 : 3

NanoDrop One光度计的使用流程主要包括以下几个步骤:


1. 开机与初始化

开机:接通电源,打开NanoDrop One光度计的电源开关,等待仪器完成初始化。

检查界面:初始化完成后,屏幕上会出现主界面,显示常用的测量选项分类,如核酸(Nucleic Acid)、蛋白质(Protein)等。


2. 选择检测方法

核酸测量:如果测量的是DNA或RNA,选择“Nucleic Acid”选项,然后进一步选择具体的核酸类型,如dsDNA(双链DNA)、ssDNA(单链DNA)或RNA。

蛋白质测量:如果测量的是蛋白质,选择“Protein”选项,然后选择蛋白质定量方法,如Protein A280(基于280nm吸光度的蛋白质定量)。


3. 基座清洁与调零

基座清洁:使用移液器吸取2μL蒸馏水(或去离子水)加到检测基座上,将样品臂放下,浸泡2-3分钟,然后用无尘纸或擦镜纸将检测基座擦拭干净。

调零:在清洁后的基座上,再次使用移液器加2μL蒸馏水(或选择与样品对应的缓冲液,如Elution Buffer),放下探头。如果“Blank”(空白检测)按钮右侧显示为“ON”,则仪器将自动进行调零;如果显示为“OFF”,需要手动点击“Blank”按钮进行调零。


4. 样品测量

加样:将加样表面和上探头的蒸馏水用滤纸吸去,然后使用移液器吸取2μL样品加到检测基座上。

测量:放下上探头,如果“Measure”(测量)按钮右侧显示为“ON”,则仪器将自动进行测量;如果显示为“OFF”,需要手动点击“Measure”按钮进行测量。


5. 查看结果

显示结果:测量结束后,屏幕左侧会显示扫描峰图,右上角列表会显示检测值,包括浓度、A260/A280(对于核酸)或A280吸光度(对于蛋白质)等参数。

详细数据:向左滑动屏幕可以查看详细数据,包括浓度、A260/A280、A260/A230(对于核酸)以及260nm、280nm等波长的检测值。


6. 连续测量与更换样品

连续测量:如果需要测量多个样品,可以在测量完一个样品后,将加样表面和上探头的样品用滤纸吸去,然后加上下一个样品,重复测量步骤。

更换空白对照:如果更换了不同的空白对照溶液(如缓冲液),需要吸去样品,清洁基座,加上新的空白对照溶液,重复调零和测量步骤。


7. 数据导出与结束实验

数据导出:实验完成后,如果需要导出数据,可以插入USB驱动器,点击屏幕上的导出按钮,选择需要导出的数据信息(如测量数据、光谱数据、查看器文件等),点击确认后数据传输完成。

结束实验:点击屏幕右下角的结束实验按钮,完成整个测量过程。


8. 仪器清洁与维护

清洁仪器:测量结束后,使用移液器吸取2μL蒸馏水加到检测基座上,放下上探头浸泡30秒,然后用无尘纸或擦镜纸清洁上下探头和基座。

维护仪器:定期检查仪器的性能,确保仪器处于良好状态。避免仪器受到阳光直射、强风吹拂或潮湿环境的影响。


注意事项

样品准备:在测量前,确保样品充分混匀,避免气泡和杂质的影响。

加样量:加样量一般为2μL,但对于粘稠的样品,可适当增加加样量,但需保证样品不溢出。

避免重复测量:在测量过程中,避免重复点击“Measure”按钮,如果需要重复测量,应先擦去样品,重新加样后再进行测量。

样品类型选择:在测量蛋白质时,确保正确选择样品类型,以便仪器能够准确计算浓度。


通过以上步骤,您可以正确使用NanoDrop One光度计进行核酸和蛋白质的浓度与纯度分析。


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