Raw264.7细胞是一种常用的小鼠单核巨噬细胞系，广泛应用于炎症、免疫学、细胞生物学和药物筛选等领域的研究。

1. 细胞特性

Raw264.7细胞是一种来源于小鼠腹腔巨噬细胞系，具有吞噬能力和分泌炎症因子的特性。这些细胞可在体外形成单层培养，是研究炎症反应和免疫应答的理想模型。

2. 细胞培养基本条件

培养基：通常使用含有高浓度的L-谷氨酰胺和含有10%胎牛血清（FBS）的培养基，如DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）。

培养温度：在37摄氏度、5% CO2和湿度饱和的培养箱中培养。

培养皿：使用无菌的培养皿或培养瓶，可选用培养皿、培养瓶或多孔板，根据实验需要选择合适的规格。

3. 细胞传代和维持

细胞传代：通常将细胞培养至80-90%的密度时进行传代，采用0.25%的胰酶-EDTA溶液消化细胞，然后进行分装。

细胞培养密度：细胞培养密度的控制对于维持细胞生长和功能非常重要，一般情况下每平方厘米培养皿培养细胞数量为1-2×10^5个。

4. 细胞培养过程

细胞传代：定期进行细胞传代以保持细胞的健康和增殖能力，通常每2-3天进行一次传代。

细胞观察：每天观察细胞的生长情况、形态和污染情况，确保细胞处于健康状态。

培养液更换：每2-3天更换一次培养液，保持培养液中的营养物质和生长因子的充足。

污染检测：定期对培养细胞进行细菌、真菌和支原体的污染检测，确保细胞培养的纯度。

5. 细胞实验应用

Raw264.7细胞在炎症、免疫学、细胞生物学和药物筛选等领域有广泛的应用，例如炎症反应模型、免疫应答研究、巨噬细胞功能分析等。

6. 操作技巧

培养操作要严格无菌，避免细胞污染。

细胞传代时胰酶的作用时间要控制好，以避免对细胞的伤害。

培养过程中避免细胞过度密集，保证细胞获得足够的营养和氧气。

7. 细胞冻存和解冻

细胞冻存：细胞生长到对数期后，采用合适的冻存液进行细胞冻存，保存于液氮罐中。

细胞解冻：使用预先配制好的培养基进行细胞解冻，快速将冻存管放入37摄氏度水浴中解冻，然后将细胞转移到预热的培养基中培养。

总结

Raw264.7细胞培养是一项常规但关键的实验技术，需要严格的无菌操作和培养条件控制。合理的培养条件和操作技巧可以保证细胞的健康和生长状态，为相关研究提供可靠的实验基础。