星形胶质细胞(Astrocytes)和神经元(Neurons)共培养是一种重要的体外细胞培养模型,用于研究神经系统的发育、功能和疾病等方面。在这种共培养模型中,星形胶质细胞和神经元相互作用,模拟了体内神经系统中胶质细胞和神经元之间的相互联系。
1. 细胞系来源
星形胶质细胞和神经元可以分别从小鼠或大鼠的大脑组织中分离得到。
2. 细胞培养基选择
星形胶质细胞常用的培养基包括DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)或者Neurobasal培养基等,添加10%胎牛血清(FBS)或者神经营养因子(如BDNF、NGF等)。
神经元常用的培养基也是Neurobasal培养基,添加神经营养因子和血清,以促进神经元的生长和成熟。
3. 培养条件的优化
培养温度一般为37摄氏度,CO2浓度为5%,在湿润、含CO2的培养箱中进行培养,有利于维持细胞的生长和代谢。
4. 细胞密度的控制
星形胶质细胞和神经元的密度需要适当控制,以确保它们能够在共培养系统中正常生长和相互作用。
5. 共培养系统的建立
将星形胶质细胞和神经元分别接种到同一培养皿中,以确保它们在共培养系统中相互作用。
通常使用多孔膜转移装置(Transwell)等装置,将星形胶质细胞和神经元分隔在两侧,但允许它们通过孔隙进行相互作用。
6. 实验操作
定期观察和记录细胞的形态和生长状态,以及神经元的突触形成和神经网络的形成。
在共培养系统中进行功能性实验,如神经元电生理记录、药物处理等,以研究神经元和星形胶质细胞之间的相互作用及其对神经系统功能的影响。
7. 应用与意义
星形胶质细胞和神经元共培养系统模拟了体内神经系统的复杂结构和功能,为研究神经系统的发育、功能和疾病提供了重要的体外模型。该共培养系统可用于研究神经元-星形胶质细胞相互作用、神经元突触形成、神经系统中的代谢调节和信号传导等方面,为神经科学研究提供了有力的工具和平台。