传代细胞培养是细胞生物学中常用的一项技术，用于维持和扩增体外培养的细胞群体。细胞在培养过程中会逐渐增殖，而当达到一定的密度时，需要进行传代操作，将细胞分为多个培养器皿以保持其健康状态和增殖能力。传代细胞的培养条件对于细胞的生长、存活和功能至关重要。

1. 培养基和培养补充物

基础培养基： 传代细胞的培养通常采用DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）或MEM（Minimum Essential Medium）等基础培养基。这些培养基提供了细胞生长和增殖所需的基本营养物质。

血清和生长因子： 在培养基中添加10%至15%的胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）或其他合适的血清替代物，如细胞生长因子（Growth Factors），以促进细胞的增殖和生长。

抗生素/抗真菌剂： 为防止细菌或真菌的污染，通常需要在培养基中添加适量的抗生素和抗真菌剂。

2. 培养条件

温度和气体环境： 传代细胞在37摄氏度的培养条件下生长最适宜，通常在5%二氧化碳（CO2）的培养箱中培养，以维持培养基的pH值和温度稳定。

培养器皿： 适合传代细胞培养的器皿包括培养瓶、培养皿或多孔板等，根据细胞密度和实验需求选择合适的器皿。

细胞密度： 在进行传代操作时，需要根据细胞的生长速率和实验需求，合理确定传代时的细胞密度，通常为70%至90%的密度。

3. 传代操作

细胞解聚： 当细胞达到适当的密度后，首先需要将细胞解除贴壁。这通常通过使用胰酶/EDTA等消化液进行细胞解聚操作。

细胞计数和分配： 解聚后的细胞进行计数，然后根据需要的传代密度，将细胞分配到新的培养器皿中。

培养条件调整： 新的培养器皿中加入新鲜的培养基和补充物，并确保培养环境的恒定性。

4. 细胞观察和记录

观察细胞形态和生长状态： 在传代过程中，需要定期观察细胞的形态和生长状态，确保细胞在培养过程中的健康状态。

记录细胞传代次数： 每次传代操作完成后，需要记录传代次数和相关的实验信息，以便追踪和管理细胞的生长历史和特性。

传代细胞的培养条件直接影响着细胞的生长和增殖能力，因此在进行传代操作时，需要严格控制培养条件，合理设计传代方案，并定期对细胞进行观察和记录，以确保细胞的健康和稳定生长。